AU 电子邮件列表 电话号码列表 疫印迹来评估蛋白质

疫印迹来评估蛋白质

及为什么突变会导致对的易感性,我们已经开始表征培养细胞中的突变蛋白。野生型、del和是通过用表达载体瞬时转染细胞产生的,其内源水平非常低(图))。使用抗单克隆抗体通过免疫印迹评估总t的表达,肌动蛋白作为每个样品蛋白质相对水平的指标。通过免疫印迹评估时,突变型的大小与野生型几乎无法区分。有趣的是,del蛋白相对于肌动蛋白的t量平均比野生型高倍(n)。t的差异不太可能

是由不同的转染引起的因为每次单独转染使用

相同数量的细胞,并且另一种突变体的t水平与野生型相当(图))。图del突变体似乎具有降低的激酶活性。细胞用单​​独的载体或含有野生型、del或的载体瞬时转染。小时后,细胞血清饥饿小时,然后收获细胞巴基斯坦电话号码表进行免疫印迹分析,使用抗磷酸酪氨酸(pyr)、抗磷酸(p)、抗总(t)和抗肌动蛋白抗体,如方法中所述。和del突变体的配体诱导激活的时间过程。用ng/ml处理细胞分钟。(左)使用抗磷酸酪氨酸抗体测定的免疫印迹曝

光分钟 右)曝光分钟 比较,通过

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检测pyr和p进行评估。接下来,我使用表达各种的细胞提取物的免活性和药物敏感非盟电子邮件列表性的各个方面。作为激酶活性的替代指标,我们测量了上“自磷酸化”yr的水平(;rb等接头分子的结合位点,导致丝裂原激活的蛋白激酶/细胞外信号的激活相关激酶级联)通过使用特异性抗体(即磷酸化或p,与t蛋白水平有关。我们还使用抗磷酸酪氨酸抗体评估了诱导细胞蛋白酪氨酸磷酸化的模式和水平。在没有血清和的情况下,即

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