AU 电子邮件列表 B2C 电子邮件列表 胞中获得总核和细胞质提

胞中获得总核和细胞质提

体组织许可证号生物库正常n=,肿瘤n=)。sm或用于检测-s的表达和分别存在于肿瘤和匹配的正常肺样本中。使用g显微镜获取图像,并使用tarearchforsm[]和uathfor[]的在线软件对斑点进行计数。细胞分级分离根据制造商的说明,使用细胞质和核纯化试剂盒(orgen)从在mm处理的培养皿中培养的细取物。nc克隆和慢病毒转导对-s的全长和截短构建体进行扩增并插入慢病毒载体(p-,ystemiosciences)中。

通过测序检查插入的序列 为了产生具有-s稳定表达的

慢病毒,使用ipofectamineregent用p–s质粒和包装质粒(ag:pol、和)转染刚果民主共和国电子邮件列表细胞。转染后、和小时收集感染性慢病毒,并通过μm过滤器过滤。细胞在聚凝胺(antaruz)存在下用病毒感染小时,并使用流式细胞术(ovell)根据表达进行分选。引物列于补充表中。双荧光素酶报告基因检测-s的完整转录物通过扩增到p载体

(romega)中 将ngp载体、ngenilla质粒(romega)和n寡核苷

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物序列列于补充表中。蛋白质提取和免疫印迹将总蛋白裂解物在×缓冲液(igma-ldrich)加蛋白酶抑制剂(oche)中匀浆,并在°下以rpm离心分钟。将上清液用于指示抗体的免疫印迹。使用esternright-pray底物和hemioc仪器(io-ad)检测信号。抗体非盟电子邮件列表 列于补充表中。稳定性测定和细胞生长到六孔板中。将放线菌素(μg/m,igma-ldrich)添加到细胞中并培养指定的时间。在恒定时间收集细胞用于提取。通过-q分析剩余的-s。β-肌动蛋白用

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