析,细胞用转染小时。之后,用洗。细胞沉淀用冰冷的%乙醇固定小时,并在-°下孵育过夜。细胞沉淀用碘化丙啶溶在°下染色小时。使用流含量。对于膜联蛋白-测定,细胞在孔板中生长,用转染小时,然后用洗涤并用胰蛋白酶收获。将细胞沉淀与膜黑暗中室温孵育分钟。将μl×结合缓冲液添加到细胞中,并使用流式细凋亡细胞的百分比。

集落形成测定将×个细胞接种到六

。天后,用洗涤细胞并用冷甲醇固定,用%结 色,使用统(作软Gibraltar电子邮件列表件拍照和计数。球形形成测定将基中,置于板中,并在°下孵育天。接下来,轻轻取出μl培养基,小心地加入μl含有的预冷培养基,以避免气泡。细胞在°下保存-天。使用mage软件对肿瘤球的面积进行量化。迁移和侵袭测定使用r)进行迁移

和侵袭测定。上室接种血清培养基中,下室

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充满培养基。培养物维持小时。然后,用棉签去除室顶部的非盟电子邮件列表动细胞,并用胞并用染色。使用免疫荧光显微镜评估每种条件的五个不同视野。计算每张膜五个视野中的平均细胞数。每个条件一式三份进行。通过处理细胞与对照细胞的比率计痕试验如前所述进行伤口划痕测定[]。单分[]。使用g显微镜获取图像,并使用tare]。sm探针列于补充表中。反义纯化和质谱(-)-的操作如前所述[]。进行了两次独立的生物学复制。在杂交步骤之前,将与

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